Salamat sa pagbisita sa Nature.com.Ang bersyon ng browser na iyong ginagamit ay may limitadong suporta sa CSS.Para sa pinakamagandang karanasan, inirerekomenda namin na gumamit ka ng na-update na browser (o huwag paganahin ang Compatibility Mode sa Internet Explorer).Pansamantala, upang matiyak ang patuloy na suporta, ire-render namin ang site nang walang mga istilo at JavaScript.
Ang post-traumatic stress disorder (PTSD) ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang kapansanan sa kakayahang i-neutralize ang mga tugon sa takot sa mga pahiwatig na nauugnay sa trauma.Itinuturo ng mga pag-aaral ng tao at hayop ang mga pagkakaiba sa paglahok ng ilang bahagi ng frontal cortex bilang mga pangunahing tagapamagitan na tumutukoy sa tagumpay ng pagsugpo sa takot, ngunit ang interplay ng mga neural circuit na tumutukoy sa pagkakaiba-iba ng mga lugar na ito ay hindi malinaw.Upang mas mahusay na maunawaan kung paano makikita ang mga indibidwal na pagkakaiba sa pag-alaala sa pagkalipol sa mga pagkakaiba sa aktibidad ng neuronal circuit, nilagyan namin ng label ang mga projection mula sa rat sublimbic cortex (IL) na may mga retrograde tracer at inihambing ang mga neuronal projection sa loob at labas ng mga IL projection neuron.Sinuri namin ang mga datos na ito, pinangkat ang mga ito ayon sa antas ng pangangalaga ng pagkupas ng memorya sa mga daga.Natagpuan namin na sa mga IL-projecting cells, ang mga neuron sa posterior parathalamus ay nagpakita ng mas mataas na aktibidad sa mga daga, na nagpakita ng mahusay na pag-alaala sa pagkalipol.Bilang karagdagan sa mga IL-projecting cells, ang pagtaas ng aktibidad ng Fos ay naobserbahan sa mga napiling lugar ng rat claustrum at ventral hippocampus na may mahusay na resolusyon.Ang aming mga resulta ay nagpapahiwatig na ang mga pagkakaiba sa pag-alaala sa pagkalipol ay nauugnay sa mga tiyak na pattern ng aktibidad ng neural sa loob at labas ng mga projection ng IL.
Nagaganap ang pagkondisyon ng takot kapag ang isang neutral na stimulus ay nauugnay sa isang aversive unconditioned stimulus (UCS), kung kaya't ang orihinal na neutral na stimulus, na ngayon ay ang conditioned stimulus (CS), ay nagdudulot ng conditioned fear response (CR) sa kawalan ng UCS.Ang pagbaligtad ng nakakondisyon na takot ay hinimok ng pagbaba ng CR sa CS dahil sa paulit-ulit na pagtatanghal ng CS sa kawalan ng UCS1.Ipinakita ng nakaraang pananaliksik na ang post-traumatic stress disorder (PTSD) ay nauugnay sa kawalan ng kakayahang matandaan ang pagkalipol ng mga nakakondisyon na tugon sa takot2.Ang pundasyon ng cognitive behavioral therapy para sa paggamot ng post-traumatic stress disorder ay exposure therapy batay sa pagkalipol ng mga natutunang tugon sa takot3,4.Samakatuwid, ang mga pag-aaral ng mga indibidwal na pagkakaiba sa takot sa pagkalipol ng daga at pinagbabatayan na mga mekanismo ng neural ay maaaring makatulong na maipaliwanag ang mga pagkakaiba sa mga tugon ng tao sa trauma at paggamot ng post-traumatic stress disorder.Sa kabila ng pag-unlad sa pagtukoy sa mga mekanismo ng neural na nakikilala ang matagumpay mula sa hindi matagumpay na mga alaala ng pagkalipol, marami pa ang dapat na matuklasan.
Ang mga modelo ng rodent ay kapaki-pakinabang sa gawaing ito dahil may mga makabuluhang pagkakaiba sa indibidwal sa paggunita ng pagkalipol ng daga7,8,9,10.Ang nakaraang gawain na nagsisiyasat sa mga neural na mekanismo ng pagkalipol ng takot sa antas ng populasyon ay nagpakita na ang pag-activate ng infralibic cortex (IL) ay kinakailangan para sa pag-alaala ng pagkalipol (refs 11, 12, 13, ngunit tingnan ang 14), at ang ilang mga pag-aaral ay natagpuan ang pagbaba sa aktibidad ng rodent sa IL na nagpapakita ng mahinang memorya tungkol sa pagkalipol kumpara sa mga rodent, na kinatatakutan.Gayunpaman, ang mga mekanismo kung saan ang mga IL ay naiiba na kasangkot sa pagpapadali sa pag-alis ng takot sa mga daga kumpara sa mga nagpapakita ng mas mahinang pagkalipol ay hindi malinaw.
Ang isang posibilidad ay ang mga pagkakaiba sa memorya ng pagkalipol ng takot sa pagitan ng mga indibidwal ay resulta ng pag-activate ng kaugalian ng mga partikular na afferent IL.Ipinakita ng mga anatomical na pag-aaral18 na ang iba't ibang mga cortical at subcortical na lugar ng utak ay nagpapadala ng mga siksik na projection sa IL, na nagpapadala naman ng mga efferent projection sa maraming bahagi ng utak.Ipinakita ng mga pag-aaral sa antas ng populasyon na ang mga projection ng IL sa amygdala ay mahalaga para sa pagkuha ng takot sa pagkalipol20,21,22 at ang input ng IL mula sa basolateral amygdala (BLA) ay nauugnay din sa pagkatuto ng pagkalipol.Mayroong mas kaunting pananaliksik sa paglahok ng IL-centered circuits sa extinction recall, bagaman ang kamakailang trabaho ay nagmumungkahi na ang parehong ventral at dorsal hippocampus ay kasangkot sa hula ng IL.Ang mga efferent projection ng IL sa recombining nucleus ng thalamus, tila, ay nakikilahok din sa memorya ng pagkalipol ng takot.
Ang mga nakaraang pag-aaral na ito ay nagsisimulang magpinta ng isang larawan ng pakikipag-ugnayan ng mga neural circuit na kasangkot sa extinction recall, ngunit napakakaunting data kung ang aktibidad sa IL-centered neural circuit ay nakakaimpluwensya sa mga indibidwal na pagkakaiba sa extinction recall.Dito, hinahangad naming matukoy kung ang mga pagkakaiba sa memorya ng pagkalipol ng takot sa pagitan ng mga indibidwal ay nauugnay sa mga pagbabago sa pag-activate ng input ng IL sa mga tiyak na rehiyon ng utak.Sa partikular, sinuri namin ang pag-activate ng IL afferent cells sa paraventricular nucleus ng thalamus (PVT), clavicle (CLA), BLA, at ventral hippocampus (vHPC).Ang mga rehiyon ng utak na ito ay pinili kapwa dahil nagpapadala sila ng mga siksik na projection sa IL at dahil may dahilan upang maghinala na maaaring sila ay kasangkot sa pagpapahayag ng takot sa pagkalipol 18 .Halimbawa, ipinakita ng isang kamakailang pag-aaral na ang PVT, isang rehiyon na kilala na kasangkot sa pagkuha ng takot at pagpaparami, ay kinakailangan para sa pagpaparami ng pagkalipol.Bilang karagdagan, ang mga nakaraang pag-aaral ay nagpakita ng pagtaas ng basal amygdala at aktibidad ng vHPC sa mga daga na nagpapahayag ng memorya ng pagkalipol.Sa wakas, ang pagsusuri ng claustrum ay higit na nagsaliksik dahil wala sa nakaraang gawain ang nagtasa sa papel nito sa pagkalipol.Gayunpaman, ang kamakailang trabaho ay nagmumungkahi na ito ay gumaganap ng isang papel sa contextual conditioning ng takot29.
Ang Viral GFP-conjugated retrograde tracers ay na-injected sa IL ng mga daga bago ang behavioral testing, at ang aktibidad ng Fos sa IL afferents ay sinusukat sa panahon ng extinction replay, fear recall, at sa mga daga na hindi sumailalim sa behavioral testing.Ang aming mga resulta ay nagpapahiwatig na ang mga projection mula sa posterior paraventricular thalamus hanggang IL ay nagpapakita ng pagtaas ng aktibidad sa mga daga na matagumpay na naaalala ang pagkalipol.Bilang karagdagan sa mga hula sa IL, ang aktibidad ng neural sa ilang mga lugar ng clavicle at ventral hippocampus ay nadagdagan sa mga daga na bumagsak nang maayos.Ipinapakita ng aming mga resulta na ang mga pattern ng intrinsic at extrinsic neural na aktibidad na inaasahang papunta sa IL ay nauugnay sa mga indibidwal na pagkakaiba sa memorya ng pagkalipol ng takot.
Limampu't apat na adult na lalaking Sprague-Dawley na daga (300-325 g sa pagdating) na nakuha mula sa Charles River Laboratories (Raleigh, NC) ay ginamit bilang mga paksa.Ang mga daga ay inilagay sa pares, na may libreng access sa pagkain at tubig, sa isang 12-oras na liwanag/madilim na cycle (ilaw sa 7 am).Dalawang pangkat ng mga daga (n = 28 at n = 26) ang ginamit para sa mga eksperimentong ito.Pagkatapos ng pagbubukod ng kamatayan, surgical error, kakulangan ng expression ng GFP sa target na site, mahinang kalidad ng tissue, at mga problema sa pag-uugali (ipinaliwanag sa Mga Paraan), ang extinction recall group ay may kasamang 21 daga at ang fear recall group ay may kasamang 7 daga, house cages.ang grupo ay binubuo ng 7 daga (35 daga ang kasama sa huling pagsusuri).Ang lahat ng mga pamamaraan ay inaprubahan ng Stony Brook University Institutional Animal Care and Use Committee at alinsunod sa ARRIVE Guidelines (https://arriveguidelines.org) at sa NIH Guidelines for the Care and Use of Laboratory Animals.
Ginamot ang mga daga dalawang araw bago ang operasyon.Ang mga daga ay na-anesthetize ng ketamine (87 mg/kg) at xylazine (10 mg/kg), inilagay sa isang stereotaxic apparatus (Stoelting, Woodale, IL) at nakatanggap ng unilateral injection ng AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) sa IL.(balanse ang kaliwa at kanang iniksyon).Para sa iniksyon, ang isang 22-gauge cannula ay ibinaba sa lugar (AP: + 3.00, ML: ± 0.6, DV: - 5.2).Magpasok ng 28G inner cannula (nakakonekta sa isang infusion pump sa pamamagitan ng PE 20 tubing) sa guide cannula upang maghatid ng 0.6 µl ng virus sa bilis na 0.15 µl kada minuto at iwanan sa lugar sa loob ng 5 minuto pagkatapos buo ang pagbubuhos..Pagkatapos tahiin, ang mga daga ay tinuruan ng meloxicam (1 mg/kg) at sa sandaling makagalaw sila ay ibinalik sila sa kanilang mga kulungan.Ang mga daga ay itinago sa kanilang mga kulungan sa loob ng humigit-kumulang 7 linggo upang payagan ang pagbawi ng virus at pag-retrograde ng transportasyon.Tatlong daga ang namatay sa ilalim ng anesthesia, na nagresulta sa 51 daga (94%) na matagumpay na nakarekober mula sa operasyon.
Ang lahat ng mga pamamaraan ay isinagawa sa 32 cm × 25 cm × 21 cm conditioning chambers (Clever Systems Inc., Reston, VA) na matatagpuan sa 45.7 cm × 43.2 cm × 43.2 cm sound-absorbing isolation boxes (Clever Sys. . Inc.).).Sa panahon ng extinction learning at extinction recall session, ang konteksto ay binago upang maiba sa orihinal na kondisyonal na konteksto.Kasama sa kondisyon A (fear generation) ang 28-volt incandescent, mga bombilya ng sambahayan (Chicago Micro Lighting, UK), habang ang kondisyon B (extinction training, extinction recall test, at fear recall test) ay may kasamang infrared LED lamp (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) ., Tsina;U48R).Bilang karagdagan, habang ang Context A ay may anti-vibration slatted floor na may stainless steel at plexiglass wall, ang Context B ay naglalaman ng mga pinturang metal insert na inilagay sa sahig at dingding.Binago din ang hugis ng Konteksto B sa pamamagitan ng paglalagay ng 33.5 cm x 21.3 cm na curved metal insert sa isang standard conditioning chamber.Bilang karagdagan, sa konteksto A ang mga silid ay pinunasan ng 5% na acetic acid, habang sa konteksto B ang mga silid ay pinunasan ng 5% na ammonium hydroxide.Sa wakas, sa konteksto B, ang mga daga ay dinala sa silid ng pagsubok sa mga balde sa halip na igulong sa mga kulungan sa mga kariton.Ang mga sesyon ng pag-uugali ay nai-record gamit ang nangungunang camera, at ang signal ng video mula sa bawat camera ay ipinasok sa software (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) na sinusuri ang pagkupas na gawi batay sa mga pagbabago sa pixel.Ang mga parameter ay pinili upang ang pag-uugali ng pagkupas na tinantya ng computer ay malapit na tumugma sa pag-uugali ng mga sinanay na tagamasid na tinantiya nang manu-mano.Isang value na nagsasaad ng porsyento ng oras ng pag-freeze na pinagsama sa 30 segundong pagitan.
Ang lahat ng mga programa sa pag-uugali ay ginagawa sa panahon ng maliwanag na bahagi ng ilaw/dilim na ikot.Ang mga daga ay ginamot 5 araw bago ang simula ng mga pamamaraan sa pag-uugali at dinala sa silid ng pag-uugali para sa huling tatlong araw ng paggamot.Sa unang araw ng pagsusuri sa pag-uugali, ang isang pangkat ng mga daga sa pagkalipol ay inilagay sa isang reflex na nakakondisyon ng takot, pagkatapos ay inilagay sa konteksto A, na binigyan ng 6 min na unstimulated acclimatization period, at pagkatapos ay binigyan ng parehong kumbinasyon ng 4 kHz, 76 dB, 30 s .tono at pangkalahatang pagwawakas, 1.0 mA, sipa 1 s (2 min ITI).Para sa lahat ng mga pagsasanay sa pag-uugali, ang mga daga ay ibinalik sa mga kulungan 2 min pagkatapos ng huling pagtatanghal ng pampasigla.Nang sumunod na araw, ang mga daga mula sa extinction-recall group ay inilagay sa context room B at nagsagawa ng 20 sound presentation (2 min ITI) bilang extinction training pagkatapos ng 6 min habituation period.Kinabukasan, ang mga daga sa extinction reproduction group ay nalantad sa 4 na tono sa konteksto B pagkatapos ng 6 na minutong acclimatization period bilang isang extinction test.Ang mga daga sa pangkat ng memorya ng pagkalipol ay pinahiran ng 60 minuto pagkatapos ng sesyon ng pag-uugali.Ang isang pangkat ng mga control rats na nag-uudyok sa mga alaala ng takot ay sumailalim sa parehong pamamaraan sa unang araw ng tugon na nakakondisyon sa takot sa konteksto A. Apatnapu't walong oras ang lumipas, ang mga daga ay inilagay sa context room B at sumailalim sa 4 na audio presentation (2- minutong ITI) bilang isang pagsubok sa pagbabalik-tanaw.takot pagkatapos ng 6 na minutong acclimatization period.Ang mga daga ay pinabanguhan 60 minuto pagkatapos ng sesyon ng pag-uugali.Isang grupo ng mga domestic control na daga ang nanatili sa kanilang mga kulungan sa bahay sa buong eksperimento at pinabanguhan sa parehong araw ng mga eksperimentong daga.Ang bawat isa sa dalawang grupo ng mga daga ay nahahati sa dalawang serye, at ang bilang ng mga hayop sa bawat pangkat ay balanse sa pagitan ng mga serye.Ang isang daga sa pangkat ng mga alaala ng takot ay hindi kasama sa pagsusuri dahil hindi ito nagpakita ng mga palatandaan ng pagkondisyon ng takot (nagyeyelong wala pang 15% ng oras sa panahon ng pagsubok sa mga alaala ng takot).Tingnan ang Figure 2A para sa isang diagram ng timeline ng pag-uugali.
Ang mga daga ay na-overdose ng Fatal Plus solution (100 mg/kg), pagkatapos ay pinabanguhan ng malamig na yelo na 10% PBS na sinusundan ng 10% na buffered formalin.Ang utak ay inalis at nakaimbak sa isang 30% sucrose solution sa formalin sa 4°C sa loob ng halos 1 linggo.Pagkatapos ang utak ay nagyelo at pinutol sa isang 40 µm makapal na cryostat.Ang mga seksyon ay nakaimbak nang sunud-sunod sa 10% PBS sa 4 ° C.Pagkatapos, ang immunofluorescence ay isinagawa sa mga libreng lumulutang na seksyon na naglalaman ng rehiyon ng utak ng interes.Ang mga seksyon ay hugasan ng 3 beses sa 10% PBS para sa 5 min bawat isa.Ang mga seksyon ay pagkatapos ay incubated sa 5% blocking solution ng normal na goat serum sa loob ng 2 oras sa temperatura ng silid, at pagkatapos ay hugasan ng tatlong beses para sa 5 minuto bawat isa sa 10% PBS.Ang mga seksyon ay pagkatapos ay incubated magdamag sa 4 ° C. sa pangunahing antibodies (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) diluted sa 1% BSA sa 10% PBS.Kinabukasan, ang mga seksyon ay hinugasan sa 10% PBS sa loob ng 30 min sa 4 ° C, pagkatapos ay 3 beses para sa 5 min sa 10% PBS at incubated na may pangalawang antibody (Alexa Fluor 594 goat anti-rabbit, red conjugate, 1:500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) sa temperatura ng silid sa loob ng 2 oras.Pagkatapos ng 3 karagdagang paghuhugas sa 10% PBS sa loob ng 5 minuto, ang mga seksyon ay inilagay sa mga glass slide at tinatakan ng Fluoromount-G (Invitrogen).Tingnan ang mga kinatawang larawan ng immunostaining sa Figure 3G.
Ang isang fluorescent microscope gamit ang isang Infinity3 digital camera (Lumenera, Ottawa, Ontario, Canada) at isang light engine (Lumencor, Beaverton, OR) na konektado sa isang Zeiss microscope ay ginamit upang makakuha ng mga larawan mula sa bawat rehiyon ng utak ng interes, kabilang ang mga seksyon na naglalaman ng IL na walang immunofluorescence.isinagawa upang kumpirmahin ang tamang pagkakalagay ng lugar ng iniksyon.Ang mga imahe na ginamit para sa pagbibilang ng cell ay nakuha sa 20x magnification.Para sa bawat seksyon ng tissue, kumuha ng isang larawan na may filter na nagbibigay-daan sa visualization ng GFP at isang larawan na may filter na nagbibigay-daan sa visualization ng Alexa Fluor red conjugate sa pangalawang antibody, at ginamit ang imaging software (Infinity Analyze, bersyon 3) para sa larawan. overlay.Kunin ang lahat ng larawan ng lahat ng bahagi ng utak gamit ang parehong oras ng pagkakalantad at makakuha ng mga setting.Anim na daga ang hindi kasama sa pagsusuri dahil ang pangunahing paghahatid ng virus ay nangyari sa labas ng IL (88% hit rate).Walong higit pang mga daga ang hindi kasama dahil, sa kabila ng pag-atake ng virus sa IL, hindi sila nagpakita ng sapat na expression ng GFP sa lahat ng target na rehiyon ng utak ng interes.Bilang karagdagan, ang isang daga ay hindi kasama dahil sa mahinang kalidad ng tissue.
Isaayos ang liwanag at kaibahan upang mabawasan ang ingay sa background sa larawan J (NIH) gamit ang parehong pamamaraan para sa bawat larawan.Ang mga bilang ng cell para sa kabuuang mga cell na may label na retrograde, kabuuang mga cell na may label na Fos, at kabuuang mga cell na may dobleng label ay ginawa nang manu-mano ng eksperimento, na hindi nakilala ang mga hayop, gamit ang plug-in ng Image J cytometer.Ang mga bilang ng cell ay na-normalize sa mga cell/mm2.Upang pag-aralan ang expression ng Fos sa mga IL-projecting cells, ang bilang ng mga cell na may dobleng label ay na-normalize sa kabuuang bilang ng mga cell na may label na retrograde.Para sa pagsusuri ng mBLA, mvHPC at pvHPC, ang mga bilang ng cell mula sa maraming 20x na imahe ay na-summed at na-normalize sa mga cell/mm2.Para sa pagsusuri ng natitirang bahagi ng mga rehiyon ng utak, isang 20x na imahe o isang bahagi ng isang 20x na imahe ay nasuri at na-normalize sa mga cell/mm2.Kasama sa pagsusuri ng vHPC ang CA1, CA2 at subdominant na mga rehiyon ng vHPC.Ipinapakita ng Figure 1 ang mga rehiyon ng utak na nasuri na may mga larawang naglalarawan sa anterior-posterior na hangganan ng eroplano.
Mga pagdadaglat at lokasyon ng mga rehiyon ng utak ng interes.Paliwanag ng mga pagdadaglat at lokasyon ng mga rehiyon ng utak na ibinigay sa manuskrito.Mapa ng utak ng pampublikong domain na kinuha mula sa Swanson (2004) Brain Map: Structure of the Rat Brain, 3rd Edition, lisensyado sa ilalim ng Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), magagamit para sa pag-download sa https://larrywswanson.com.
Ang porsyento ng oras ng pag-freeze ay naa-average sa loob ng 30 segundong panahon ng pag-playback ng tono, hindi kasama ang mga intermediate interval.Ang mga rate ng extinction recall ay kinakalkula sa pamamagitan ng pagpapahayag ng porsyento ng fade time sa panahon ng extinction recall bilang porsyento ng fade sa unang 4 na extinction training trials (fade sa panahon ng apat na extinction recall tone/fade sa unang apat na extinction training tones*100).Ang mga mababang marka ay nagpapahiwatig ng magandang fade memory, at ang mataas na mga score ay nagpapahiwatig ng mahinang fade memory.Inuri-uri ang mga daga ayon sa marka ng extinction recall, kung saan ang mga daga sa nangungunang third ng extinction recall score ay inuri bilang "bad extinction rats" at ang mga daga sa huling dalawang-katlo ng extinction recall score ay inuri bilang "good".Memory fading daga.
Ginagamit ang mga nonparametric na pagsusulit dahil ang data ay madalas na lumalabag sa mga pagpapalagay tungkol sa normal na distribusyon at/o homogeneity ng mga pagkakaiba.Ginamit ang korelasyon ng ranggo ng Spearman upang matukoy kung mayroong makabuluhang kaugnayan sa pagitan ng mga marka ng pag-alaala ng pagkalipol at mga marker ng Fos at dalawahang marker sa mga rehiyon ng utak na interesado sa lahat ng mga daga na sumailalim sa pagsubok sa pagbabalik ng pagkalipol.Ang Mann-Whitney U-test ay ginamit upang matukoy kung mayroong pagkakaiba sa pagitan ng dalawang independyenteng grupo.Ang Kruskal-Wallis test ay ginagamit upang matukoy kung ang 2 o higit pang mga grupo ay naiiba sa isa't isa, at ang Dunn multiple comparison test ay ginagamit kapag ang Kruskal-Wallis statistic ay makabuluhan.Ang pagkupas sa panahon ng pagkalipol ng pag-aaral ay tinasa gamit ang paulit-ulit na mga panukalang pagsusuri ng pagkakaiba sa grupo bilang inter-subject factor at ang pagsubok bilang intra-subject factor. Ang mga resulta ay itinuturing na makabuluhan kapag p <0.05 para sa lahat ng mga istatistikal na pagsusulit. Ang mga resulta ay itinuturing na makabuluhan kapag p <0.05 para sa lahat ng mga istatistikal na pagsusulit. Результати считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Ang mga resulta ay itinuturing na makabuluhan sa p <0.05 para sa lahat ng mga pagsusulit sa istatistika.当所有统计检验的p < 0.05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0.05 时，结果被认为是显着的。 Результати считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Ang mga resulta ay itinuturing na makabuluhan sa p <0.05 para sa lahat ng mga pagsusulit sa istatistika.
Ipinapakita ng Figure 2 ang experimental timeline (Figure 2A) at ang frequency distribution ng lahat ng daga na napapailalim sa extinction (Figure 2B). Ang mga daga sa mabuti at mahihirap na grupo ng pagkalipol ay malaki ang pagkakaiba sa mga kinakalkula na mga marka ng pagbabalik ng pagkalipol (U = 0, p <0.001) (Larawan 2C). Ang mga daga sa mabuti at mahihirap na grupo ng pagkalipol ay malaki ang pagkakaiba sa mga kinakalkula na mga marka ng pagbabalik ng pagkalipol (U = 0, p <0.001) (Larawan 2C). Крысы в ​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались по этим рассчитанным показателям угашением значительно различались по этим рассчитанным показателям показателям припомались по этим рассчитанным показателям припомгинаниям <1,0нием припомались по этим рассчитанным показателям припоминани (1,0,0) припоминаниям (C2.ям припоминани). Ang mga daga sa mabuti at mahihirap na grupo ng pagkalipol ay malaki ang pagkakaiba sa mga kinakalkula na mga rate ng pagbabalik ng pagkalipol (U=0, p<0.001) (Larawan 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着差异（U = 2.0（U = 2. U = 0，p <0.001）（图2C， В этих рассчитанных показателях припоминания угашения крысы в ​​группах с хорошим и плохим угашением значизтел ​​угашения крысы в ​​группах с хорошим и плохим угашением значизтель, 0, льно расский и плохим угашением значизтель , 0. Sa mga kinakalkula na rate ng pagbabalik ng pagkalipol, ang mga daga sa mabuti at mahihirap na grupo ng pagkalipol ay malaki ang pagkakaiba (U = 0, p <0.001) (Larawan 2C).Walang makabuluhang pagkakaiba sa oras ng pagyeyelo sa pagitan ng mga pangkat na may mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, at pag-alaala ng takot sa panahon ng batayang panahon ng sesyon ng reflex na nakakondisyon ng takot (X2(2) = 2.746, p = 0.253) (Larawan 2D).Bilang karagdagan, sa panahon ng pagtatanghal ng unang tono ng reflex na nakakondisyon ng takot, walang makabuluhang pagkakaiba sa oras ng pagyeyelo sa pagitan ng mga pangkat na may mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol at paggunita ng takot (X2(2) = 1.107, p = 0.575), bilang pati na rin sa panahon ng takot sa panahon ng ikalawang tono.Sa panahon ng sesyon ng conditioning, mayroong isang makabuluhang pagkakaiba sa oras ng pagyeyelo sa pagitan ng mga pangkat na may mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, at paggunita ng takot (X2(2) = 2.214, p = 0.331) (Larawan 2D).Wala ring makabuluhang pagkakaiba sa oras ng fade sa pagitan ng mabuti at mahihirap na mga grupo ng pagkalipol sa panahon ng pagsasanay sa pagkalipol ng baseline (U = 45.00, p = 0.799) (Larawan 2D). Susunod, nagkaroon ng makabuluhang pangunahing epekto ng trial block (5 tones per block) sa oras na ginugol sa pagyeyelo sa panahon ng extinction training session (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), na nagpapahiwatig na naganap ang pagkalipol ng pag-aaral (Fig. 2D ). Susunod, nagkaroon ng makabuluhang pangunahing epekto ng trial block (5 tones per block) sa oras na ginugol sa pagyeyelo sa panahon ng extinction training session (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), na nagpapahiwatig na naganap ang pagkalipol ng pag-aaral (Fig. 2D ). Затем наблюдался значительный основной эффект пробного блока (5 тонов на блок) на время, затрачиваемое на замирание во время тренировки угашения (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило ( halimbawa 2D). Nagkaroon noon ng isang makabuluhang pangunahing epekto ng pagsubok na bloke (5 tono bawat bloke) sa oras na kinuha upang mag-freeze sa panahon ng pagsasanay sa pagkalipol (F(2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), na nagpapahiwatig na ang pag-aaral ng pagkalipol ay nagaganap (Fig . 2D). ).接下来 ， 在 消退 训练 期间 试块 试块 （每 块 5 音） 对 冻结 时间 有 显着 的 主 （（f （2.884，54.80） = 8.331 ， p <0.001） ， 表明 发生 了 学习 （（图 2d）） .接下来 ， 在 消退 训练 期间 试块 试块 （每 块 5 音） 对 冻结 时间 有 显着 的 主 （（f （2.884，54.80） = 8.331 ， p <0.001） ， 表明 发生 了 学习 （（图 2d）） . Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значительное основное влияние на время замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило (рис . 2D). Pagkatapos, sa panahon ng pag-aaral ng pagkalipol, ang mga bloke ng pagsubok (5 tono bawat bloke) ay may makabuluhang pangunahing epekto sa oras ng pagkupas (F(2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), na nagpapahiwatig na nagaganap ang pagkatuto ng pagkalipol (Fig. 2D) .Gayunpaman, ang extinction group (F(1, 19) = 3.091, p = 0.095) ay walang makabuluhang epekto sa fade time sa buong extinction training period, at walang interaksyon sa pagitan ng trial block at extinction group (F(4). , 19)).76) = 1.890, p = 0.121) (Larawan 2D). Sa panahon ng sesyon ng pagsubok, mayroong isang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, at mga grupo ng pag-alala ng takot sa oras na ginugol sa pagyeyelo sa panahon ng baseline (X2 (2) = 8.569, p = 0.014) kung kaya't ang pangkat ng takot sa pagbabalik ay lubos na nagyelo. higit pa sa magandang pangkat ng pagkalipol (Mean Rank Diff. = 10.57, p = 0.017), ngunit hindi sa mahihirap na pangkat ng extinction (Mean Rank Diff. = − 3.714, p > 0.999) (Fig. 2D). Sa panahon ng sesyon ng pagsubok, mayroong isang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, at mga grupo ng pag-alala ng takot sa oras na ginugol sa pagyeyelo sa panahon ng baseline (X2 (2) = 8.569, p = 0.014) kung kaya't ang pangkat ng takot sa pagbabalik ay lubos na nagyelo. higit pa sa magandang pangkat ng pagkalipol (Mean Rank Diff. = 10.57, p = 0.017), ngunit hindi sa mahihirap na pangkat ng extinction (Mean Rank Diff. = − 3.714, p > 0.999) (Fig. 2D).Sa panahon ng sesyon ng pagsubok, nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, at mga grupo ng pag-alala ng takot sa oras na ginugol sa pagyeyelo sa panahon ng baseline (X2(2) = 8.569, p = 0.014), kung kaya't ang pangkat ng takot na naaalala ay nagyelo. makabuluhang .больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не в групего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не в групего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не в групего вымирания . mas malaki kaysa sa magandang pangkat ng pagkalipol (ang ibig sabihin ng pagkakaiba ng ranggo = 10.57, p = 0.017) ngunit hindi sa masamang pangkat ng pagkalipol (ang ibig sabihin ng pagkakaiba ng ranggo = −3.714, p > 0.999) (Larawan 2D).在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 和 恐惧 回忆组 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 （（x2 (2) = 8.569 ， p = 0.014） ， 因此 恐惧 回忆组 冻结 显着 超过 良好 的 灭绝 组（平均秩差= 10.57，p = 0.017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3.714，p > 0.999）（剛.在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异 （（x2 (2) = 8.569 ， p = 0.014） 恐惧 回忆组 冻结 显着 显着 良好 的 组 组 组 组 组 组 恐惧 回忆组 冻结 显着 的 组 组 组 组 组 组 组 恐惧 回忆组 回忆组 显着 显着 组 组 组 组 组 组组 组 组（平均秩差= 10.57，p = 0.017），但不是差绝组（平均秩差= – 3.714，p > 0.999） В течение периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угашением, группой с плохим угашением и группой с припоминанием страха с точки зрения времени замирания на исходном уровне (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), поэтому припоминание страха группа замерзает значительно чаще . Sa panahon ng pagsubok, nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na grupo ng pagkalipol, ang mahinang pangkat ng pagkalipol, at ang pangkat ng takot sa pag-alala sa mga tuntunin ng oras ng pagyeyelo sa baseline (X2(2) = 8.569, p = 0.014), kaya ang pag-alala sa takot mas madalas na nagyeyelo ang grupo kaysa sa pangkat na may mahusay na pagkalipol (ang ibig sabihin ng pagkakaiba sa ranggo = 10.57, p = 0.017) ngunit hindi ang pangkat na may mahinang pagkalipol (ang ibig sabihin ng pagkakaiba sa ranggo = -3.714, p > 0.999) (Larawan 2D).Ang magandang extinction group, ang poor extinction group, at ang fear recall group ay nagkaroon din ng makabuluhang pagkakaiba ng fade times sa tono ng presentasyon ng test session (X2(2) = 14.93, p = 0.001), kaya ang magandang extinction group ay may makabuluhang mas kaunti. oras.oras ng pagyeyelo kaysa sa mahinang extinction group (mean rank difference = 9.286, p = 0.044) at ang fear memory group (mean rank difference = 13.86, p = 0.001) (Fig. 2D).
Mga indibidwal na pagkakaiba sa paggunita ng pagkalipol.(A) Balangkas ng mga surgical at behavioral procedure.(B) Pamamahagi ng dalas na nagpapakita ng mga indibidwal na pagkakaiba sa nawawalang mga marka ng memorya.(C) Katibayan na ang mga pangkat na idinisenyo batay sa kinakalkula na mga marka ng pag-alaala sa pagkalipol ay kumakatawan sa dalawang magkaibang mga phenotype.(D) Ang ibig sabihin ng porsyento ng oras na nag-freeze ang mga daga para sa masamang pagkalipol, magandang pagkalipol, at pag-alala sa takot sa 30 segundong mga cell ng isang nakakondisyon na sesyon ng reflex ng takot, sa mga tono na 20, 30 s, ay bumagsak sa 5 bloke sa panahon ng sesyon ng pag-aaral ng pagkalipol (4 na tono ) .bawat isa), at sa apat na tono sa mga sesyon ng mga alaala ng paghina at mga alaala ng takot.Ang mga error bar ay kumakatawan sa karaniwang paglihis ng mean. *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001, ****p < 0.0001. *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001, ****p < 0.0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001, ****p < 0.0001. *p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001，****p < 0.0001。 *p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001，****p < 0.0001。 *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001, ****p < 0.0001.
Ang isang retrograde indicator ay na-injected sa IL (Fig. 3A) at ang bilang ng mga GFP+ cells kasama ang anterior-posterior axis ng rehiyon ng interes ay natukoy (Fig. 3B-F).Nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa bilang ng mga GFP+ cells sa pagitan ng anterior, middle at posterior PVT (X2(2) = 8.200, p = 0.017), kaya ang mPVT ay nagpakita ng mas maraming GFP+ cells kaysa sa aPVT (mean rank) Diff.= 18.37, p = 0.035) at pPVT (mean rank Diff. = 17.71, p = 0.045) (Fig. 3C).Bagaman ang ilang mga hayop ay hindi nakakita ng anumang mga cell ng GFP + sa pCLA at samakatuwid ay hindi ma-map ang aktibidad sa rehiyong ito, walang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng anterior, middle, at posterior CLA (X2(2) = 5.596, p = 0.061).Bilang ng mga cell ng GFP+ (Figure 3D).Pagkatapos, dahil ang ilang mga cell ng GFP+ ay natagpuan sa aBLA o avHPC sa ilang mga daga, ang gitna at likod lamang ng mga lugar na ito ang nasuri.Ang gitna at posterior BLA (U = 393, p = 0.009) ay naiiba nang malaki sa bilang ng mga cell ng GFP +, kaya ang pBLA ay nagpakita ng higit pang mga projection ng IL kaysa sa mBLA (Larawan 3E).Katulad nito, mayroong isang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mid at posterior vHPC, kaya ang mga pvHPC ay nagpakita ng higit pang mga IL projection kaysa sa mvHPCs (U = 403.5, p = 0.014) (Larawan 3F).Ang Figure 3G ay isang huwarang larawan na nagpapakita ng Fos, aavRG-GFP, at mga cell na may dobleng label.
Tukuyin ang mga IL afferent sa buong rehiyon ng utak ng interes.(A) Schematic na representasyon ng pamamahagi ng aavRG-CAG-GFP sa buong daga IL.(B) Mga larawan ng kinatawan ng mga retrograde marker sa iba't ibang mga anteroposterior na lokasyon sa rehiyon ng utak ng interes.Quantification ng retrograde labeling kasama ang anteroposterior axis (C) paraventricular thalamus, (D) clavicle, (E) basolateral tonsil, at (F) ventral hippocampus.(G) Mga larawang kinatawan na nagpapakita ng retrograde aavRG labeling, Fos labeling, at double aavRG at Fos labeling sa aPVT.Ang mga error bar ay kumakatawan sa karaniwang paglihis ng mean. *p < 0.05, **p < 0.01. *p < 0.05, **p < 0.01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0.05, **p < 0.01. *p < 0.05，**p < 0.01. *p < 0.05，**p < 0.01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0.05, **p < 0.01.Scale bar 100 µm.Ang brain map ng pampublikong domain sa panel A ay ginawa mula sa Swanson (2004) Brain Map: Rat Brain Structure, 3rd Edition, na lisensyado sa ilalim ng Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 International License (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/) magagamit para sa pag-download sa https://larrywswanson.com.
Ang aktibidad ng Fos na tukoy sa global at IL projection ay nasuri sa aPVT, mPVT at pPVT sa lahat ng mga daga.Walang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala ng takot, at mga grupo ng home cell sa expression ng Fos sa aPVT (X2(3) = 3.888, p = 0.274) (Fig. 4A), at walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng Fos sa aPVT sa pagitan ng expression at extinction recall (rs = 0.092, p = 0.691) (Figure 4B) o sa pagitan ng Fos expression sa aPVT IL afferents at extinction recall (rs = 0.143, p = 0.537) (Figure 4D).Gayunpaman, sa aPVT IL afferents, malaki ang pagkakaiba ng expression ng Fos sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala ng takot, at mga grupo ng home cell (X2(3) = 15.05, p = 0.002), kaya ang pangkat ng pag-alala ng takot ay nagpakita ng medyo mahusay na pagkalipol.regression (mean rank difference = 11.54, p = 0.003), mahinang regression (mean rank difference = 10.57, p = 0.034), at home cell (mean rank difference = 12.79, p = 0.005) mga grupo (Fig. 4C).Dagdag pa, walang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala ng takot, at mga grupo ng home cell para sa expression ng Fos sa mPVT (X2(3) = 2.272, p = 0.518) (Fig. 4E) at para sa expression ng Fos sa mPVT..Makabuluhang ugnayan sa extinction recall (rs = 0.168 p = 0.468) (Figure 4F).Bagaman mayroong isang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mabuti, masama, pag-alaala ng takot, at mga grupo ng cell sa bahay sa expression ng Fos sa IL afferent mPVT cells (X2 (3) = 9.252, p = 0.026), ang paghahambing ng post hoc ay hindi nagsiwalat ng anuman o dalawa.Mga makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mga grupo (Figure 4G).Bukod dito, walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos sa IL-afferent mPVT cells at extinction recall (rs = 0.174, p = 0.450) (Larawan 4H). Susunod, mayroong isang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala ng takot, at mga grupo ng hawla sa bahay sa pagpapahayag ng Fos sa pPVT (X2 (3) = 13.89, p = 0.003), upang ang magandang pangkat ng pagkalipol (Mean Rank Diff. = 14.96, p = 0.010), ngunit hindi ang mahinang pagkalipol (Mean Rank Diff. = 12.86, p = 0.113) o fear recall group (Mean Rank Diff. = 2.571, p > 0.999), ang nagpakita ng mas maraming Fos expression kaysa sa pangkat ng hawla sa bahay (Larawan 4I). Susunod, mayroong isang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala ng takot, at mga grupo ng hawla sa bahay sa pagpapahayag ng Fos sa pPVT (X2 (3) = 13.89, p = 0.003), upang ang magandang pangkat ng pagkalipol (Mean Rank Diff. = 14.96, p = 0.010), ngunit hindi ang mahinang pagkalipol (Mean Rank Diff. = 12.86, p = 0.113) o fear recall group (Mean Rank Diff. = 2.571, p > 0.999), ang nagpakita ng mas maraming Fos expression kaysa sa pangkat ng hawla sa bahay (Larawan 4I). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошим угашением (средний ранг Diff. = 14,96, p = 0,010), но не в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) или группы воспоминаний о страхе (средняя ранговая разница = 2,571, p > 0,999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (рис. 4I). Dagdag pa, nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alaala ng takot, at mga grupo ng home cell sa expression ng Fos sa pPVT (X2(3)=13.89, p=0.003), upang ang magandang pangkat ng pagkalipol (mean rank Diff. = 14.96, p = 0.010), ngunit hindi sa mahihirap na pangkat ng pagkalipol (ang ibig sabihin ng pagkakaiba sa ranggo = 12.86, p = 0.113) o ang pangkat ng memorya ng takot (ang ibig sabihin ng pagkakaiba sa ranggo = 2.571, p > 0.999), ay nagpakita ng mas malinaw na ekspresyon ng Fos kaysa sa ang home cell group (Larawan 4I).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显着 差异 （x2 （3） = 13.89 ， p = 0.003） 使得 （（mean ranggo difff.= 14.96, p = 0.010)，但不是较差的消退(Mean Rank Diff. = 12.86, p = 0.113) 或恐惧回忆组(Mean Rank Diff. = 2.571, I mean Rank Diff. = 2.571, p = 0.113) ）.= 14.96, p = 0.010), 但不是较差的消退(Mean Rank Diff. = 12.86, p = 0.113) ）。Pangalawa, may mga makabuluhang pagkakaiba sa pagpapahayag ng Fos sa pPVT sa pagitan ng mabuti, masama, pag-alala ng takot, at mga grupo ng cell sa bahay (X2(3) = 13.89, p = 0.003), na ginagawa ang magandang pangkat ng paggamit (nangangahulugang pagkakaiba sa ranggo = 14.96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) или группе отзыва страха (средняя разница рангов = 2,571, p > 0,999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0.010), ngunit hindi mas masahol pa sa pagkalipol (ibig sabihin ang pagkakaiba sa ranggo = 12.86, p = 0.113) o grupo ng pag-alala ng takot (nangangahulugang pagkakaiba sa ranggo = 2.571, p > 0.999) kaysa sa home cell group (Larawan 4I)..Gayunpaman, walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng pPVT Fos expression at extinction recall (rs = 0.051, p = 0.825) (Larawan 4J).Sa wakas, nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa pagpapahayag ng Fos sa pPVT IL afferents sa pagitan ng mga pangkat na may mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, alaala ng takot, at sa mga selula ng tahanan (X2(3) = 12.34 p = 0.006), napakahusay na ekspresyon ng Fos sa IL- ay mas masahol pa kaysa sa mga extinction group (mean rank difference = 12.54, p = 0.014) at sa home cell (mean rank difference = 12.89, p = 0.049) (Fig. 4K) at makabuluhang nauugnay sa IL afferents sa loob ng pPVT Sa pagitan ng activation at Ang pagbawi ng pagkalipol, ang mas mahusay na pag-alaala sa pagkalipol ay nauugnay sa higit na pag-activate ng mga IL afferent na ito (rs = -0.438, p = 0.047) (Larawan 4L).
Ang aktibidad ng Fos ay nadagdagan sa mga IL afferent ng posterior paraventricular thalamus (PVT) sa mga daga, na nagpakita ng magandang regression.(A) Walang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mga pangkat sa expression ng Fos sa aPVT.(B) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos at pag-alaala sa pagkalipol sa aPVT.(C) Ang pangkat ng pag-alala ng takot ay nagpakita ng pagtaas ng expression ng Fos sa mga IL afferent kumpara sa lahat ng iba pang mga grupo.(D) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos sa IL afferent at extinction recall sa aPVT.(E) Walang makabuluhang pagkakaiba sa intergroup sa expression ng Fos sa mPVT.(F) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos at memorya ng pagkalipol sa mPVT.(G) Ang expression ng Fos sa mga afferent IL cells sa mPVT ay hindi naiiba nang malaki sa pagitan ng mga pangkat.(H) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos sa IL afferent at pagkalipol sa mPVT.(I) Isang mahusay na extinct na grupo, ngunit walang ibang grupo, ang nagpakita ng pagtaas ng aktibidad ng Fos sa pPVT kumpara sa home cage group.(J) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng pagpapahayag ng Fos at pag-alaala sa pagkalipol sa pPVT.(K) Ang mahusay na pangkat ng pagkalipol ay nagpakita ng pagtaas ng expression ng Fos sa mga cell ng afferent ng IL kumpara sa mahinang pangkat ng pagkalipol at ang pangkat ng home cell.(L) Mayroong isang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos sa IL afferent at extinction recall, kaya ang magandang extinction recall ay nauugnay sa mas malaking Fos expression sa IL afferent.Ang mga error bar ay kumakatawan sa karaniwang paglihis ng mean. *p < 0.05, **p < 0.01. *p < 0.05, **p < 0.01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0.05, **p < 0.01. *p < 0.05，**p < 0.01. *p < 0.05，**p < 0.01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0.05, **p < 0.01.
Ang pandaigdigang at IL projection-specific na aktibidad ng Fos sa aCLA at mCLA ng mga daga ay sinuri sa lahat ng grupo. Nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa magandang pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala sa takot, at mga grupo ng hawla sa bahay sa ekspresyon ng Fos sa aCLA (X2 (3) = 8.455, p = 0.036) upang ang pangkat ng takot na maalala (Mean Rank Diff. = 14.50, p = 0.049), ngunit alinman sa mga mahihirap (Mean Rank Diff. = 10.21, p = 0.373) o magandang extinction (Mean Rank Diff. = 4.607, p > 0.999) na mga grupo, ay hindi nagpakita ng mas maraming Fos expression kaysa sa home cage group ( Larawan 5A). Nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa magandang pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala sa takot, at mga grupo ng hawla sa bahay sa ekspresyon ng Fos sa aCLA (X2 (3) = 8.455, p = 0.036) upang ang pangkat ng takot na maalala (Mean Rank Diff. = 14.50, p = 0.049), ngunit alinman sa mga mahihirap (Mean Rank Diff. = 10.21, p = 0.373) o magandang extinction (Mean Rank Diff. = 4.607, p > 0.999) na mga grupo, ay hindi nagpakita ng mas maraming Fos expression kaysa sa home cage group ( Larawan 5A). Между группами с хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так что группа припоминания страха (среднее ранговое различие = 14,50, p = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим вымиранием (средняя ранговая разница = 4,607, p > 0,999) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетке ( Рис .5А). Nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa pagpapahayag ng aCLA Fos sa pagitan ng magandang pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alaala ng takot at mga grupo ng mga cell sa bahay (X2(3) = 8.455, p = 0.036), upang ang pangkat ng pag-alala ng takot (nangangahulugang pagkakaiba sa ranggo = 14.50, p = 0.049), ngunit hindi rin ang mahihirap (ang ibig sabihin ng pagkakaiba sa ranggo = 10.21, p = 0.373) o ang mahusay na pangkat ng pagkalipol (ang ibig sabihin ng pagkakaiba sa ranggo = 4.607, p > 0.999) ay hindi nagpakita ng higit na pagpapahayag ng Fos kaysa sa home cell group (Fig. 5A) . acla 中 fos 表达 的 良好 消退 、 消退差 、 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 (x2 (3) = 8.455, p = 0.036) ， 恐惧 恐惧 回忆组 (nangangahulugang ranggo diff. = 14.50 ， p = 0.049） ， 但 无论是 差 （平均 秩差 = 10.21 ， p = 0.373） 还是 良好 灭绝 （平均 秩差 = 4.607 ， p> 0.999） 组 ， 平均 显示 出 比 家庭 笼组 更 多 的 fos 表达 （图 5a) . Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8.455, p = 0.036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (ibig sabihin Pagkakaiba ng Ranggo = 14.50 ， P = P = P = P = P = P = 14. 0.049） ， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10.21 ， p = 0.373） ， p = 0.373） 0.999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой по экспрессии Fos в aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), поэтому группа отзыва страха (среднее ранговое различие = 14,50) , p = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) и с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 4,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). Nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala sa takot at mga grupo ng cell sa bahay sa expression ng aCLA Fos (X2(3) = 8.455, p = 0.036), kaya ang pangkat ng pag-alala ng takot (nangangahulugang pagkakaiba sa ranggo = 14.50), p = 0.049 ), ngunit ang mga pangkat na may mahihirap (mean rank difference = 10.21, p = 0.373) at magandang pagkalipol (mean rank difference = 4.607, p > 0.999) ay nagpakita ng mas mataas na Fos expression kaysa sa home cell group (Fig. 5A). .Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng pandaigdigang pagpapahayag ng Fos sa (rs = 0.036, p = 0.876) (Larawan 5B) o pagpapahayag ng Fos sa IL aCLA afferent cells (rs = -0.282, p = 0.215) at pag-alaala sa pagkalipol (Larawan 5B)..5D), wala ring makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala ng takot, at mga grupo ng home cell sa expression ng Fos sa aCLA IL afferents (X2(3) = 6.722, p = 0.081) (Larawan 5C)..). Susunod, mayroong isang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala sa takot, at mga grupo ng hawla sa bahay sa expression ng Fos sa mCLA (X2 (3) = 10.12, p = 0.018) upang ang mahusay na pangkat ng pagkalipol (Mean Rank Diff . = 12.93, p = 0.038), ngunit hindi rin ang mahinang pagkalipol (Mean Rank Diff. = 5.143, p > 0.999) o ang fear recall group (Mean Rank Diff. = 14.00, p = 0.063) ay hindi nagpakita ng higit na Fos expression sa mCLA kamag-anak sa pangkat ng hawla sa bahay (Larawan 5E). Susunod, mayroong isang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala sa takot, at mga grupo ng hawla sa bahay sa expression ng Fos sa mCLA (X2 (3) = 10.12, p = 0.018) upang ang mahusay na pangkat ng pagkalipol (Mean Rank Diff . = 12.93, p = 0.038), ngunit hindi rin ang mahinang pagkalipol (Mean Rank Diff. = 5.143, p > 0.999) o ang fear recall group (Mean Rank Diff. = 14.00, p = 0.063) ay hindi nagpakita ng higit na Fos expression sa mCLA kamag-anak sa pangkat ng hawla sa bahay (Larawan 5E). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, воспоминаниями о страхе и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что группа с хорошим угашением (средняя разница рангов . = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, p > 0,999), ни группы отзыва страха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей экспрессии Fos sa mCLA. Nagkaroon noon ng isang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, mga alaala ng takot at mga grupo ng home cell sa expression ng mCLA Fos (X2(3) = 10.12, p = 0.018), upang ang mahusay na pangkat ng pagkalipol (mean difference rank = 12.93, p = 0.038), ngunit hindi rin ang mga mahihirap na grupo ng pagkalipol (ibig sabihin ang pagkakaiba sa ranggo = 5.143, p > 0.999) o ang mga grupo ng pag-alala ng takot (ibig sabihin ang pagkakaiba ng ranggo = 14.00, p = 0.063) ay hindi nagpakita ng mas malaking ekspresyon ng Fos sa mCLA.kumpara sa home cage group (Larawan 5E).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 良好 消退组 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 （x2 （3） = 10.12 ， p = 0.018） ， 良好 （（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（ （（（ Mean Ranggo Diff .= 12.相对于家庭笼组（图5E）。 = 12.93, p = 0.038) ， 在 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5.143 ， p> 0.999） 和 回忆组 （平均 秩差 = 14.00 ， p = 0.063） 未 显示 更 多 多 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угасанием, группой с плохим угасанием, группой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018), так, группа хорошего угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средняя разница рангов = 5,143, p > 0,999), ни группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспрессию Много Fos по сравнению с группой с домашней клеткой (Рисунок 5E). Dagdag pa, nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa pagpapahayag ng Fos sa mCLA sa pagitan ng mahusay na pangkat ng pagkalipol, ang mahinang pangkat ng pagkalipol, ang pangkat ng feedback ng takot, at ang pangkat ng home cell (X2(3) = 10.12, p = 0.018), sa gayon, ang mabuti pagkalipol (ang ibig sabihin ng pagkakaiba sa ranggo = 12.93, p = 0.038), ngunit sa mCLA ay walang mahinang pagkalipol (ang ibig sabihin ng pagkakaiba sa ranggo = 5.143, p > 0.999) o ang pangkat ng pag-alala ng takot (ang ibig sabihin ng pagkakaiba sa ranggo = 14.00, p = 0.999) = 0.063) Multi Fos expression kumpara sa home cell group (Larawan 5E).Gayunpaman, ang global Fos expression sa mCLA (rs = 0.321, p = 0.156) (Fig. 5F) o sa afferent IL mCLA cells (rs = -0.121, p = 0.602) at extinction recall (Fig. 5H), walang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan mga pangkat na may mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alaala ng takot, at isang home cell para sa pagpapahayag ng Fos sa IL mCLA afferent cells (X2(3)=4.923, p=0.178) (Larawan 5G).
Ang aktibidad ng Fos ay nakataas sa mid-claustrum sa mga daga na may mahusay na memorya ng pagkalipol.(A) Ang grupo ng pag-alala ng takot, ngunit hindi ang iba pang mga grupo, ay nagpakita ng pagtaas ng aktibidad ng Fos kumpara sa home cell group sa aCLA.(B) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos sa aCLA at pag-alaala sa pagkalipol.( C ) Ang expression ng Fos sa IL afferent aCLA cells ay hindi naiiba nang malaki sa pagitan ng mga pangkat.(D) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng pagpapahayag ng Fos sa IL afferent at pag-alaala sa pagkalipol sa aCLA.(E) Ang mahusay na extinct na grupo, ngunit hindi ang iba pang mga grupo, ay nagpakita ng pagtaas ng aktibidad ng Fos sa mCLA kumpara sa home cell group.(F) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos at pag-alaala sa pagkalipol sa mCLA.(G) Ang expression ng Fos sa IL mCLA afferent cells ay hindi naiiba nang malaki sa pagitan ng mga pangkat.(H) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos sa IL afferent at pagkalipol sa mCLA.Ang mga error bar ay kumakatawan sa karaniwang paglihis ng mean. *p < 0.05. *p < 0.05. *р < 0,05. *p < 0.05. *p < 0.05. *p < 0.05. *р < 0,05. *p < 0.05.
Pagkatapos, ang aktibidad ng Fos na partikular sa projection at IL sa mBLA at pBLA ay nasuri sa lahat ng mga pangkat ng mga daga.Walang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala ng takot, at mga grupo ng home cell sa expression ng Fos sa mBLA (X2(3)=0.944, p=0.815) (Larawan 6A).Wala ring makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mga pangkat na may magandang regression, mahinang regression, fear recall, at home cell Fos expression sa IL mBLA afferent cells (X2(3)=0.518, p=0.915) (Larawan 6C).Bilang karagdagan, walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng global na expression ng Fos sa mBLA (rs = 0.126, p = 0.588) (Larawan 6B) at Fos expression sa IL mBLA afferent cells (rs = 0.200, p = 0.385) (rs = 0.200, p = 0.385).p = 0.385).Figure 6D) at extinction recall.Wala ring makabuluhang pagkakaiba sa mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, memorya ng takot, at mga home cell group sa expression ng Fos sa pBLA (X2(3) = 4.246, p = 0.236) (Fig. 6E), at wala ring makabuluhang pagkakaiba sa pBLA Mabuti.pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala ng takot, at mga grupo ng home cell sa expression ng Fos sa mga IL afferent cells (X2(3)=1.954, p=0.582) (Larawan 6G).Sa wakas, ang pandaigdigang Fos expression sa pBLA (rs = 0.070, p = 0.762) (Fig. 6F) at Fos expression sa pBLA IL afferent cells (rs = 0.122, p = 0.597) at extinction recall (Fig. 6H).
Ang mga indibidwal na pagkakaiba-iba sa pagpaparami ng pagkalipol ay hindi nai-mapa sa mga pagkakaiba sa pagpapahayag ng Fos sa basolateral amygdala.(A) Walang makabuluhang pagkakaiba sa intergroup sa expression ng Fos sa mBLA.(B) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos at pag-alaala sa pagkalipol sa mBLA.( C ) Ang expression ng Fos sa IL mBLA afferent cells ay hindi naiiba nang malaki sa pagitan ng mga grupo.(D) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos sa IL afferent cells at extinction recall sa mBLA.(E) Walang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng grupo sa pagpapahayag ng Fos sa pBLA.(F) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng pagpapahayag ng Fos at pag-alaala sa pagkalipol sa pBLA.(G) Ang expression ng Fos sa mga afferent na mga cell ng IL pBLA ay hindi naiiba nang malaki sa pagitan ng mga pangkat.(H) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos sa IL afferent cells at extinction recall sa pBLA.Ang mga error bar ay kumakatawan sa karaniwang paglihis ng mean.
Sa wakas, ang aktibidad ng Fos na partikular sa projection at IL ay nasuri sa mvHPC at pvHPC sa lahat ng mga daga. Nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng magandang pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala sa takot, at mga pangkat ng kulungan sa bahay sa Fos expression sa mvHPC (X2 (3) = 8.056, p = 0.045) upang ang magandang pagkalipol (Mean Rank Diff. = 13.29 , p = 0.031), ngunit alinman sa mahinang pagkalipol (Mean Rank Diff. = 6.857, p > 0.999) o pag-alala sa takot (Mean Rank Diff. = 8.000, p = 0.864) na mga grupo ay hindi nagpakita ng mas maraming expression ng Fos kaysa sa home cage group (Fig. 7A). Nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng magandang pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala sa takot, at mga pangkat ng kulungan sa bahay sa Fos expression sa mvHPC (X2 (3) = 8.056, p = 0.045) upang ang magandang pagkalipol (Mean Rank Diff. = 13.29 , p = 0.031), ngunit alinman sa mahinang pagkalipol (Mean Rank Diff. = 6.857, p > 0.999) o pag-alala sa takot (Mean Rank Diff. = 8.000, p = 0.864) na mga grupo ay hindi nagpakita ng mas maraming expression ng Fos kaysa sa home cage group (Fig. 7A). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29) , p = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в группе с отзывом страха (средняя ранговая разница = 8,000, p = 0,864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис. 7А). Nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa pagpapahayag ng mvHPC Fos sa pagitan ng mga pangkat na may mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alaala ng takot, at mga selula ng tahanan (X2(3) = 8.056, p = 0.045), napakahusay na pagkalipol (nangangahulugang pagkakaiba sa ranggo = 13.29), p = 0.031), ngunit wala sa mahihirap na pangkat ng pagkalipol (ibig sabihin ang pagkakaiba sa ranggo = 6.857, p > 0.999) o sa pangkat ng pag-alala ng takot (ibig sabihin ang pagkakaiba sa ranggo = 8.000, p = 0.864) ay ang ekspresyon ng Fos na mas mataas kaysa sa pangkat ng tahanan.cell (Larawan 7A). MVHPC 中 fos 表达 的 良好 消退 、 不良 消退 、 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （x2 (3) = 8.056, p = 0.045） ， 因此 良好 消退 （平均 秩差 = 13.29） ， p = 0.031 ） ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 = 6.857 ， p> 0.999） 还是 恐惧 回忆 （平均 秩差 = 8.000 ， p = 0.864） 组都 显示 出 家庭 笼组 更 多 的 的 fos 表达 （图 2）。 MVHPC 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 (3) = 8.056, p = 0.045） ， 良好 （（平均 秩差 秩差 = 13.29） p = 0.031） ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6.857 ， p> 0.999） 还 是 恐惧 （平均 秩差 秩差 = 8.000 ， p = 0.864） 组 都 家庭 笼组 多 的 fos 表达 图 图 。。。。 ））））））））））））））））） Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страха» и «домашняя клетка» для экспрессии Fos в mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) и, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница рангов = 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) и воспоминания о страхе (средняя разница рангов = 8,000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). Nagkaroon ng makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mabuti, masama, pag-alala sa takot, at mga home cell group para sa Fos expression sa mvHPC (X2(3) = 8.056, p = 0.045) at samakatuwid ay isang magandang regression (mean rank difference = 13.29), p = 0.031), ngunit ang mga pangkat na may mahinang pagkalipol (ibig sabihin ang pagkakaiba ng ranggo = 6.857, p > 0.999) at mga alaala ng takot (ibig sabihin ang pagkakaiba sa ranggo = 8.000, p = 0.864) ay nagpakita ng mas mataas na ekspresyon ng Fos kaysa sa grupo sa hawla sa bahay (Larawan 2).7A).Gayunpaman, walang makabuluhang pagkakaiba (X2(3) = 4.893, p = 0.180) (Larawan 7C).Bilang karagdagan, walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng global na expression ng Fos sa mvHPC (rs = -0.233, p = 0.309) (Larawan 7B) at Fos expression sa mvHPC afferent IL cells (rs = 0.056, p = 0.810) (Larawan 7D).at isang ulat sa pagkawala.Dagdag pa, walang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mahusay na pagkalipol, mahinang pagkalipol, pag-alala ng takot, at mga grupo ng home cell sa expression ng Fos sa pvHPC (X2(3) = 3.623, p = 0.353) (Larawan 7E), at walang makabuluhang pagkakaiba.pagkakaiba sa magandang regression ng Fos expression sa pvHPC afferent IL cells, mahinang regression, fear memory, at home cell group (X2(3)=3.871, p=0.276) (Fig. 7G).Sa wakas, walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng pvHPC global Fos expression (rs = -0.127, p = 0.584) (Figure 7F) at Fos expression sa IL-afferent pvHPC cells (rs = 0.176, p = 0.447) at extinction recall (Figure 7F ).7H).
Ang ekspresyon ng Fos ay nakataas sa ventral hippocampus ng mga daga, na nagpapahiwatig ng mahusay na pagkalipol ng memorya.(A) Ang mahusay na extinct na grupo, ngunit hindi ang iba pang mga grupo, ay nagpakita ng pagtaas ng pagpapahayag ng Fos sa mvHPC kumpara sa home cell group.(B) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos at pag-alaala sa pagkalipol sa mvPHC.( C ) Ang expression ng Fos sa mvHPC afferent IL cells ay hindi naiiba nang malaki sa pagitan ng mga pangkat.(D) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos sa IL afferent at extinction recall sa mvHPC.(E) Walang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng mga pangkat sa expression ng Fos sa pvHPC.(F) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng pagpapahayag ng Fos at pag-alaala sa pagkalipol sa pvHPC.(G) Ang expression ng Fos sa pVHPC afferent IL cells ay hindi naiiba nang malaki sa pagitan ng mga pangkat.(H) Walang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng expression ng Fos sa IL afferent at extinction recall sa pvHPC.Ang mga error bar ay kumakatawan sa karaniwang paglihis ng mean. *p < 0.05. *p < 0.05. *р < 0,05. *p < 0.05. *p < 0.05. *p < 0.05. *р < 0,05. *p < 0.05.Ang aming pangunahing pagsusuri para sa lahat ng mga rehiyon ay nagpakita ng paghahambing sa tatlong antas sa kahabaan ng anteroposterior axis, bagaman sinuri din namin ang bawat rehiyon na bumagsak sa anteroposterior axis.Ang mga resulta ng mga pagsusuri na ito ay ipinakita sa talahanayan 1.
Dito sinubukan namin kung ang mga indibidwal na pagkakaiba sa pag-alaala sa pagkalipol ay makikita sa iba't ibang mga pattern ng aktibidad ng afferent sa lower limbic cortex.Hanggang dito, sinuri namin ang aktibidad ng Fos sa mga projection ng IL mula sa paraventricular thalamus, claustrum, basolateral tonsil, at ventral hippocampus pagkatapos ng extinction replay.Sa mga IL-projecting cells, nakita namin ang mas mataas na aktibidad sa posterior region ng PVT sa mga daga na nagpakita ng magandang extinction recall kumpara sa mga daga na may mahinang pagkalipol.Walang mga pagkakaiba sa mga IL afferent mula sa clavicular nucleus, ventral hippocampus, o basolateral tonsil.Bilang karagdagan sa mga IL-projecting cells, ang pagtaas ng aktibidad ng neural ay naobserbahan sa mga napiling lugar ng rat claustrum at ventral hippocampus na may mahusay na resolusyon.Ang aming mga resulta ay nagpapahiwatig na ang matagumpay na memorya ng pagkalipol ay inayos ng mga tiyak na projection ng PVT sa IL at non-IL-targeting na mga cell sa claustrum at ventral hippocampus.
Natagpuan namin na ang hula ng PVT IL ay aktibo sa mga daga na nagpakita ng mahusay na pag-alaala sa pagkalipol, na naaayon sa isang kamakailang pag-aaral na nagpapakita na ang PVT ay kinakailangan para sa pagbabalik sa pagkalipol.Ang pag-aaral na ito ay hindi gumamit ng mga manipulasyon na partikular sa subregion, ngunit ipinakita na ang parehong mga PVT projection sa lateral central amygdala at IL projection sa PVT ay kailangan upang magparami ng pagkalipol.Ang aming mga resulta ay nagpapahiwatig na, bilang karagdagan sa IL-PVT-CeL chain, isang post-PVT entry sa IL ay maaari ding kailanganin para sa quench recall.Kaya, lumalabas na ang parehong efferent at afferent na mga koneksyon sa IL ay kasangkot sa pagpaparami ng pagkalipol.Ang isang mahalagang susunod na hakbang ay upang matukoy kung ano ang nagiging sanhi ng pPVT na magsenyas ng extinction reproduction sa antas ng neural circuit.Bilang karagdagan sa kaugnayan sa IL, ang mga nakaraang pag-aaral sa pagsubaybay sa duct31,32 ay nagpakita na ang pPVT ay tumatanggap ng input mula sa ventral periaqueductal grey (vPAG), na nauugnay sa pagkalipol ng pag-aaral33,34,35,36.Bagaman ang papel ng vPAG sa extinction recall ay hindi pa naitatag, ang hula ng pPVT ng vPAG ay isang kaakit-akit na kandidato dahil sa kanilang density at ang paglahok ng parehong mga rehiyon sa pagbuo ng nakaraang ebidensya ng pagkalipol ng takot.
Ang isa pang mahalagang aspeto ng aming mga resulta ng PVT ay ang mga ito ay dalubhasa sa kanilang anterior-posterior axis.Kapansin-pansin, ang aktibidad ng neuronal ng PVT projection sa IL ay nakakaugnay sa kabaligtaran ng estado ng pag-uugali, tulad na ang aktibidad ng pre-PVT projection sa IL ay nauugnay sa pag-alala ng takot, habang ang pPVT projection ay aktibo pagkatapos ng matagumpay na pagkalipol sa pag-alaala (ibig sabihin, takot).Ang functional heterogeneity na ito sa loob ng PVT ay hindi nakakagulat dahil sa nakaraang gawain [tinalakay sa 37].Ang isang kapansin-pansing halimbawa ng functional distribution sa PVT ay lumitaw kamakailan sa isang pag-aaral na nailalarawan ang mga katangian ng mga partikular na uri ng cell sa PVT.Ang pag-aaral na ito ay nagpapakita na ang DRD2-nagpapahayag ng mga dopamine cells ay nakararami na ipinahayag sa pPVT, nagpapasigla sa forelimb cortex, at tumutugon sa aversive stimuli.Ang pangalawang populasyon ng cell ay nakararami na ipinahayag sa aPVT at minarkahan ang paglipat sa isang estado ng mababang physiological arousal at innervates ang cortex ng lower limbs.Halos hindi magkasya ang aming mga resulta sa pattern na ito, dahil ang mga IL-projecting aPVT cells ay aktibo sa panahon ng fear recall, habang ang mga pPVT projection ay aktibo at ang mga hayop ay nagpapakita ng mababang antas ng takot.Mayroong hindi bababa sa dalawang posibleng paliwanag para sa maliwanag na pagkakaiba.Una, ang mga natukoy na uri ng cell ay hindi matatagpuan ng eksklusibo sa isang anterior-posterior site ng TVV.Kaya, ang mga aktibong IL-projecting pPVT cells sa mga daga na may mahusay na memorya ng pagkalipol ay maaaring kabilang sa isang klase ng mga cell na mas malamang na ma-detect sa aPVT at magsenyas ng isang paglipat sa isang mababang estado ng pagpukaw.Ang parehong ay maaaring totoo para sa IL-projecting mga cell sa aPVT na-activate pagkatapos ng takot memory.Pangalawa, ang mga nakaraang pag-aaral sa pagsubaybay ay natukoy ang pagkakaroon ng mga IL3-projecting pPVT, bagaman ang ilan ay lumilitaw na nagmula sa mga cell na naglalaman ng DRD2, ang iba pang mga uri ng cell ay maaaring mag-project sa IL at maging aktibo sa matagumpay na pagpaparami ng pagsusubo.
Bagaman ang layunin ng pag-aaral na ito ay kilalanin ang mga pagkakaiba sa pagitan ng mga daga na nagpapakita ng iba't ibang mga extinction phenotypes, ang mga eksperimentong ito ay nagsiwalat din ng mga bagong data na may kaugnayan sa mga mekanismo ng memorya ng takot.Kapansin-pansin, natagpuan namin ang pagtaas ng aktibidad ng Fos sa nauunang CLA sa mga daga na may memorya ng takot.
Ang clavicle ay nakaposisyon bilang sentro ng cortical na komunikasyon at kasangkot sa mga proseso mula sa sensory integration hanggang sa atensyon at pagtulog40,41,42,43.May limitadong katibayan kung paano kasangkot ang claustrum sa pagkondisyon ng takot o pagpapahayag ng takot, gayunpaman, ipinakita ng naunang pananaliksik na ang pagpapahayag ng takot sa konteksto ay kasangkot sa aktibidad ng Fos sa claustrum.Kamakailan ay naiulat na ang pagsugpo sa mga projection ng atresia sa entorhinal cortex sa panahon ng contextual fear conditioning ay nakakapinsala sa pangmatagalang pagbuo ng memorya, kahit na ang kanilang pangangailangan para sa pagpapahayag ng takot ay hindi pa nasubok.Sa parehong pag-aaral, ang pagtaas ng pag-activate ng Fos ay naobserbahan kapag ang mga hayop ay nalantad sa isang bagong kapaligiran kumpara sa mga daga na nakalantad sa isang pamilyar na kapaligiran.Sa pag-iisip na ito, ang pag-activate ng CLA na iniuulat namin dito ay maaaring dahil sa pagkakalantad sa bagong camera sa panahon ng pagsubok, sa halip na takot na maalala mismo.Upang mas tumpak na makilala ang pag-andar ng mga kandado sa takot at pagpoproseso ng sitwasyon, ang mga pag-aaral sa hinaharap ay dapat gumamit ng naka-target na pagmamanipula ng lock.
Bagaman ipinakita ng nakaraang trabaho na ang PVT ay nauugnay sa expression ng memorya ng takot, 45, 46, 47 hindi namin napansin ang anumang pagbabago sa kabuuang expression ng Fos sa mga daga nang maalala nila ang takot 48 oras pagkatapos ng pagkondisyon.Ang pagkakaibang ito ay maaaring ipaliwanag ng ilang salik, kabilang ang dating pagsubok sa trabaho sa takot sa mga discrete na pahiwatig sa parehong konteksto kung saan naganap ang conditioning, samantalang sa aming eksperimento, ang pagsubok ay ginawa sa isang bagong silid.Bilang karagdagan, pinatay namin ang aming mga hayop 60 minuto pagkatapos ng pagsubok, habang ang nakaraang trabaho ay gumamit ng oras na 90 minuto.Sa wakas, sa mga nakaraang pag-aaral, ang pagsubok ay isinagawa sa isang silid kung saan ang mga hayop ay maaaring tumugon nang may gana, samantalang sa aming trabaho, ang mga daga ay sinubukan nang walang tugon sa gana.Bagama't nagbibigay-daan ito para sa ilang antas ng nakakondisyon na pagsugpo, may katibayan na nagpapahintulot sa mga hayop na pigilan ang presyon upang makakuha ng pagkain habang sinusuri kung natatakot sila sa mga pahiwatig na lumilikha ng motivational conflict (ibig sabihin, takot laban sa gantimpala), na isang pangunahing kadahilanan na nagpapasigla.pakikilahok PVT48, 49. .
Ang basolateral amygdala ay kilala na kasangkot sa pagkuha ng takot sa pagkalipol50,51 at mayroong ebidensya na ang BLA projection sa IL ay kasangkot din sa prosesong ito23.Gayunpaman, hindi malinaw kung ang BLA at ang mga koneksyon nito ay kasangkot sa pagbabalik ng pagkalipol.Ang mga pag-aaral ng imaging23,28 ay nagpakita ng pagtaas ng aktibidad ng BLA sa mga hayop na nagpapaalala sa mga kupas na alaala.Habang ang aming nakaraang gawain ay hindi nagpakita ng pagkakaiba sa pag-activate ng BLA sa pagitan ng mabuti at masamang mga daga ng pagkalipol, iminumungkahi ng aming mga resulta dito na ang pag-alaala sa pagkalipol sa pangkalahatan ay hindi nakakaapekto sa BLA o pag-activate sa paghula sa BLA IL.Alinsunod sa aming mga natuklasan, kahit na ang mga pag-aaral sa pagmamanipula ng circuit ay nagmumungkahi na ang mga input ng IL sa BLA ay mahalaga para sa pag-aaral ng pagkalipol, hindi sila kinakailangan para sa pag-alaala sa pagkalipol.Gayunpaman, ang papel ng BLA ay hindi maaaring ganap na balewalain dahil ang kamakailang ebidensya ay nagmumungkahi na ang ilang mga uri ng cell sa BLA ay kinakailangan upang magparami ng pagkalipol.
Kapansin-pansin, ang pag-alala ng takot ay hindi nagresulta sa pag-activate ng Fos sa BLA, dahil ang mga nakaraang pag-aaral ng lesyon, gamot, at imaging ay nagpahiwatig ng lugar na ito sa pagpapahayag ng takot at / o muling pagsasama-sama ng takot pagkatapos ng pagkuha 54,55,56,57.Ang data na ipinakita dito ay pinagsama ang basal at lateral subnucleus ng amygdala, at ang nakaraang data ay nagmumungkahi na ang expression ng takot ay nagtutulak sa aktibidad ng Fos sa dorsal na bahagi ng lateral nucleus.Pinag-aralan namin ang pinagbabatayan at lateral na data, ngunit walang pagkakaiba sa alinmang kaso (hindi ipinakita ang data) at ang parehong mga lugar ay bumagsak sa data na ipinakita namin dito.Hindi namin sinuri ang mga subregion ng lateral amygdala, kaya maaaring ma-mask ang mga partikular na pagbabago sa lugar na ito.Ang isa pang posibilidad na walang pagbabago sa aktibidad ng Fos sa BLA ay dahil sa timing ng mga alaala ng takot kumpara sa conditioning.Ipinakita ng ilang nakaraang gawain na ang kontribusyon ng BLA sa expression ng takot ay bumababa sa oras pagkatapos ng pag-conditioning, kung kaya't ang expression ay nakadepende sa BLA sa 24 na oras pagkatapos ng conditioning ngunit independyente sa 7 araw (ref. 45 ngunit tingnan ang 58).naganap 48 oras pagkatapos ng pagsasanay, na ginagawang ang kakulangan ng pagbabago sa aktibidad ng Fos sa puntong ito ay malamang na sumasalamin sa mga pagbabagong umaasa sa oras sa pakikilahok ng BLA sa pagpapahayag ng takot.
Sa wakas, nakakita kami ng katibayan na ang matagumpay na memorya ng pagkalipol ay nauugnay sa ventral hippocampus.Ito ay katangian ng "intermediate" na mga vHPC dahil ang parehong pattern ay hindi nakita sa posterior na rehiyon.Alinsunod sa nakaraang gawain, wala kaming nakitang pagbabago sa pag-activate ng Fos sa mga afferent na vHPC IL.Mayroong malaking katibayan na ang vHPC28,60,61 ay kinakailangan para sa pagsasakatuparan ng takot kapag ang CS ay nangyari sa labas ng konteksto kung saan nangyayari ang pagkupas, at na ito ay depende sa hindi bababa sa bahagi sa pagpasok ng vHPC sa IL13.Batay sa mga nakaraang resulta na ito, inaasahan namin na ang mahinang pagkupas ay maiugnay sa pagtaas ng hinulaang aktibidad ng IL ng vHPC.Gayunpaman, hindi ito ang kaso dahil walang pagkakaiba sa aktibidad ng Fos sa mga vHPC na may label na retrograde na IL o walang label na mga cell sa mga vHPC.Iminumungkahi nito na ang kawalan ng kakayahang matandaan ang pagkupas sa konteksto ng pagkupas ay maaaring magpalitaw ng ibang mekanismo kaysa sa takot sa pag-renew.
Mahalagang tandaan ang ilan sa mga likas na limitasyon sa disenyo at pagsusuri at kung paano nakakaapekto ang mga ito sa ating mga konklusyon.Una, hinati namin ang mga hayop sa itaas at mas mababang ikatlong bahagi, at ang mga daga sa "mabuti" at "masama" batay sa mga marka ng pag-alaala sa pagkalipol.Ginagawa ito upang maiwasan ang mga scheme ng grupo na naghahati sa mga hayop sa magkakahiwalay na grupo mula sa gitna ng pamamahagi, o mga scheme ng grupo na nagbubukod ng mga hayop sa gitna ng pamamahagi, tulad ng paghihiwalay sa pamamagitan ng median o paghahambing ng upper at lower thirds ng mga daga .gusto naming iwasan ang sitwasyong ito dahil ang median division ay hindi nagpapakita ng pagkakaiba-iba ng mga tugon ng tao sa trauma na sinusubukan naming i-modelo.Bilang karagdagan, habang ang paghahambing sa itaas at mas mababang ikatlong bahagi ng mga daga ay nagbibigay-daan sa amin upang ihambing ang mga grupo ng magkatulad na laki, ang diskarte na ito ay hindi pinapansin ang mga hayop sa gitna ng pamamahagi at hindi tumpak na nagpapakita ng pagkakaiba-iba sa mga reaksyon sa pinsala.Bagama't ang aming pamamaraan ay maaaring magdusa mula sa mga problema sa heterogenous na pagkakaiba-iba at paghahambing ng mga pangkat na may hindi pantay na laki ng sample, nakukuha nito ang sinusubukan naming gayahin nang mas mahusay kaysa sa mga alternatibong pamamaraan.
Ang mga resulta na ipinakita dito ay tumutulong sa amin na mas maunawaan kung paano ang mga indibidwal na pagkakaiba sa pag-alaala sa pagkalipol ay makikita sa mga pagkakaiba sa aktibidad ng neural circuit.Ang aming mga natuklasan ay maaaring may kaugnayan sa post-traumatic stress disorder, na kilala na nauugnay sa labis na takot at kawalan ng kakayahang alisin ang mga tugon sa takot.Ipinakita namin na ang mga pagkakaiba sa pag-alaala sa pagkalipol ay nauugnay sa mga pagkakaiba-iba sa intrinsic at extrinsic neural na aktibidad na inaasahang papunta sa IL.Ang mga pagkakaiba-iba na ito ay ipinamahagi sa mga natatanging rehiyon kasama ang anteroposterior axis, na higit na binibigyang-diin ang kahalagahan ng pagtatasa ng pag-andar ng utak sa antas ng subregional.Ang mga kawalan ng kasalukuyang pamamaraan ay kinabibilangan ng kaugnayan ng pag-aaral at ang pagtutok sa mga lalaking daga.Ang hinaharap na pananaliksik ay dapat matukoy ang mga mekanismo ng neurobiological na pinagbabatayan ng pag-aaral ng pagkalipol sa mga babaeng daga at gumamit ng mga pamamaraan upang gumuhit ng mga sanhi ng inferences.
Ang mga dataset na ginamit at/o nasuri sa kasalukuyang pag-aaral ay makukuha mula sa kani-kanilang mga may-akda sa makatwirang kahilingan.
Pavlov IP Conditioning: isang pag-aaral ng physiological activity ng cerebral cortex.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Paglalapat ng mga prinsipyo sa pag-aaral sa paggamot ng mga reaksyon pagkatapos ng trauma. Rothbaum, BO, & Davis, M. Paglalapat ng mga prinsipyo sa pag-aaral sa paggamot ng mga reaksyon pagkatapos ng trauma.Rotbaum BO at Davis M. Paglalapat ng mga prinsipyo sa pag-aaral sa paggamot ng mga post-traumatic na reaksyon.Rotbaum BO at Davis M. Paglalapat ng mga prinsipyo sa pag-aaral sa paggamot ng mga post-traumatic na reaksyon.i-install.Kolehiyo ng New York.ang agham.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Review ng exposure therapy: isang gintong pamantayan para sa paggamot sa PTSD. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Review ng exposure therapy: isang gintong pamantayan para sa paggamot sa PTSD.Rauch SA, Eftekhari A. at Ruzek DI Isang pagsusuri ng exposure therapy: ang gold standard na paggamot para sa posttraumatic stress disorder. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSD 治疗的黄金标准。 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Review ng exposure therapy: Ang gintong pamantayan para sa paggamot sa PTSD.Rauch, SA, Eftekhari, A. at Ruzek, DI Isang pagsusuri ng exposure therapy: ang gold standard na paggamot para sa posttraumatic stress disorder.J. Rehabilitasyon.pagpapaunlad ng reservoir 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Long exposure therapy: nakaraan, kasalukuyan at hinaharap.Pagpigil sa Pagkabalisa 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
G. Millard et al.Ang umiiral at nakuha na mga sanhi ng pagkawala ng memorya sa post-traumatic stress disorder: mga natuklasan mula sa isang kambal na pag-aaral.J. Psychiatrist.tangke ng imbakan.42(7), 515-520 (2008).
G. Millard et al.Ang neurobiological na batayan ng kawalan ng kakayahan na alalahanin ang kumukupas na mga alaala sa post-traumatic stress disorder.biology.Sikolohiya.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Mga indibidwal na pagkakaiba sa takot: Ihiwalay ang reaktibiti ng takot at mga phenotype ng pagbawi ng takot. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Mga indibidwal na pagkakaiba sa takot: Ihiwalay ang reaktibiti ng takot at mga phenotype ng pagbawi ng takot.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. at LeDoux, JE Mga indibidwal na pagkakaiba sa takot: pagkilala sa mga phenotype ng reaktibiti ng takot at pagbabalik ng takot. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Mga indibidwal na pagkakaiba sa takot: paghihiwalay ng tugon sa takot at talahanayan ng pagbawi ng takot.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. at LeDoux, JE Mga indibidwal na pagkakaiba sa takot: ang paghihiwalay ng mga tugon sa takot at ang phenotype ng pagbawi ng takot.J. Trauma.presyon 20(4), 413–422 (2007).
Ang Russo, AS & Parsons, RG Acoustic startle response sa mga daga ay hinuhulaan ang inter-individual na pagkakaiba-iba sa pagkalipol ng takot. Ang Russo, AS & Parsons, RG Acoustic startle response sa mga daga ay hinuhulaan ang inter-individual na pagkakaiba-iba sa pagkalipol ng takot.Ang Russo, AS at Parsons, RG Acoustic startle response sa mga daga ay hinuhulaan ang mga indibidwal na pagkakaiba sa pagkalipol ng takot. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异。 Russo, AS & Parsons, RGAng Russo, AS at Parsons, RG Acoustic startle response sa mga daga ay hinuhulaan ang mga indibidwal na pagkakaiba sa pagkalipol ng takot.Neurobiology.pag-aaral.Alaala.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Ang indibidwal na pagkakaiba-iba sa pagpapabalik ng takot sa pagkalipol ay nauugnay sa phosphorylation ng mitogen-activated protein kinase sa infralimbic cortex. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Ang indibidwal na pagkakaiba-iba sa pagpapabalik ng takot sa pagkalipol ay nauugnay sa phosphorylation ng mitogen-activated protein kinase sa infralimbic cortex.Russo, AS, Lee, J. at Parsons, RG Indibidwal na pagkakaiba-iba sa pagkalipol ng takot na maalala ay nauugnay sa mitogen-activated protein kinase phosphorylation sa infralimbic cortex. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Ang pag-alaala sa paglaho ng takot ay nauugnay sa mga indibidwal na pagkakaiba sa peripheral 美裯中丝裂原活化筒能激酶的phosphorification.Russo, AS, Lee, J. at Parsons, RG Ang mga indibidwal na pagkakaiba sa pagkalipol ng takot sa panahon ng pagpapabalik ay nauugnay sa phosphorylation ng mitogen-activated protein kinases sa lower limb cortex.Psychopharmacology 236(7), 2039–2048 (2019).